Содержание
-
Гоувпо«Красноярский государственный медицинский университет им. Проф.в.Ф. Войно-ясенецского»Факультет фундаментального медицинского образованиякафедра анатомии и гистологии человека
Окраска CуданIII Выполнила: студентка пед.фак. Ондар С.А Проверила: к.м.н доцент Хипилина Е.А
-
План
1) окрашивание Суданом III 2) Посуда и оборудование 3) Реактивы 4) Ход определение 5)Клиническое значение 6) Методы окрашивание 7) нормальные величины
-
Судан iii
Судан III Судан — группа нейтральных жирорастворимых красителей. Общая формула: C22H16N2O Существует несколько типов с разными заместителями: Судан I, Судан II, Судан III, Судан IV.
-
Окрашивание суданом III
(О.В.Волкова, Ю.К.Елецкий, 1982). Является наиболее распространенным методом выявления жира. Липиды локализуются в цитоплазме клеток главным образом в мембранах органелл и обнаруживаются преимущественно в нейтрофильных гранулоцитах. Играют важную роль в проницаемости мембран. Цитохимическое исследование липидов основано на применении красящих веществ, растворяющихся в жирах (судан III, судан IV, черный судан и др.). Для выявления нейтрального жира пользуются суданом III, окрашивающим жир в оранжевый цвет. Липоиды выявляются лучше суданом черным (черное окрашивание).
-
2) Посуда и оборудование
химические стаканы или кюветы мерные цилиндры пипетки воронки горелка
-
3) реактивы
Формалиновый спирт (1 часть формалина и 4 части 96% спирта) 70% этиловый спирт (к 100 мл 96 % спирта прибавить 39,18 мл дистиллированной воды) Альфа-нафтол Раствор судана (к 100 мл 70 % спирта добавляют 20 мл дистиллированной воды, 1,2 г альфа-нафтола и в избытке судан III. Раствор кипятят в течение 10 мин и фильтруют) Краситель Романовского-Гимзы
-
4) Ход определение
Приготовление раствора красителя. В 100 мл горячего 70% спирта засыпают 0,2-0,3 г порошка судана III, несколько раз взбалтывают и ставят в термостат (при 58°С) на несколько часов, затем охлаждают и фильтруют.
-
ход окраски
1.Замороженные срезы (из свежей или фиксированной в формалине ткани) на несколько минут переносят из воды в 50% спирт. 2. Помещают в спиртовой раствор красителя на 15-30 мин (при применении щелочного раствора судана III - на 5 минут). 3. Быстро ополаскивают в 50% спирте.
-
4. Промывают в дистиллированной воде. 5. Подкрашивают ядра кислым гемалауном или гематоксилином Эрлиха. 6. Промывают и заключают в желатин или глицерин-желатин
-
После окраски
Результат: жировые вещества интенсивно оранжево-красного цвета, ядра - синие. Окраску срезов раствором Судана III следует проводить в бюксе с закрытой крышкой. В противном случае спирт испаряется, и из насыщенного раствора судан III выпадает в виде осадка, который остается в препарате.
-
Методы:
Тотальный препарат: окраска судан III – гематоксилином Срез после декальцинации; окраска по Шморлю Срез; окраска по Маллори
-
Тотальный препарат: окраска судан III - гематоксилином
Препарат - белая жировая ткань. Тотальный препарат сальника. Окраска судан III -гематоксилином. 1. Препарат является тотальным. б) Это означает, что перед нами - не срез органа, а участок сальника, растянутого на предметном стекле. 2. Жировые клетки на препарате заполнены крупными каплями жира (1), которые окрашены суданом Ш в ярко-оранжевый цвет.
-
Срез после декальцинации; окраска по Шморлю
Препарат - пластинчатая костная ткань. Поперечный срез трубчатой кости. Окраска по методу Шморля. 1. Применённый метод окраски позволяет выявить стенки костных полостей (1) и канальцев (2), окрашивающиеся в тёмно-коричневый цвет благодаря высокому содержанию здесь коллагенновых волокон. 2. В костных полостях находятся тела костных клеток (остеоцитов), а в канальцах - отростки этих клеток.
-
Срез; окраска по Маллори
4. Препарат - срез яичника кролика. Окраска по методу Маллори. 1. В методе Маллори используются 3 красителя (п. 11.3.3), что делает картину многоцветной. 2. На снимке - женская половая клетка (ооцит), находящаяся в фолликуле яичника. 3. Цитоплазма (1) клетки окрашена в розовый, окружающая её блестящая оболочка (2) - в голубой, а ядра фолликулярных клеток (3) - в фиолетовый цвет.
-
Клинические значение
Повышение содержания липидов в нейтрофилах наблюдается при острых лейкозах и обострении хронических лейкозов. При острых лейкозах липиды в бластных клетках обнаружены у больных при миелобластном и монобластном вариантах и не выявлены при лимфобластном остром лейкозе. При недифференцированном остром лейкозе бластные клетки лишь в небольшом количестве (1,38 - 3,02%) содержат липиды.
-
Вывод:
В мазках периферической крови липиды содержатся в цитоплазме нейтрофилов в виде обильной зернистости. Большинство нейтрофилов (69 - 80%) у здоровых людей красятся интенсивно (+++), 18-36% дают окраску средней интенсивности (++) и 10% слабо окрашены (+). Средний цитохимический коэффициент (СЦК) липидов в нейтрофилах 2,617 - 2,683.
-
Благодарю за внимание
Нет комментариев для данной презентации
Помогите другим пользователям — будьте первым, кто поделится своим мнением об этой презентации.