Презентация на тему "Реакция бласттрансформации лимфоцитов"

Содержание

• 
  Слайд 1

  Реакция бласттрансформации лимфоцитов

• 
  Слайд 2

  РБТЛ

  О функциональной активности Т- и В-лимфоцитов судят по реакции бластной трансформации (РБТЛ) с использованием митогена - фитогемагглютинина (ФГА). Реакция бласттрансформациихарактеризует способность лейкоцитов к трансформации и размножению под воздействием антигенов, аллергенов и митогенов.

• 
  Слайд 3
  

  Пролиферативный ответ лимфоцитов на антигены даёт представление о выраженности специфической сенсибилизации организма. Реакция бласттрансформации применяется для комплексной оценки иммунного статуса больного.

• 
  Слайд 4
  

  Метод определения РБТЛ: Микроскопия. Нормальные пределы РБТЛ: 1) Для РБТЛ с ФГА: 50-70% 2) Для РБТЛ с антигеном: отрицательный Материал для анализа РБТЛ: Плазма крови. Забор крови осуществляется в пробирку с гепарином. Кровь должна быть доставлена в лабораторию в течение 2 часов.

• 
  Слайд 5
  

  Подготовка пациента к РБТЛ: Забор крови осуществляют в утренние часы натощак. Накануне исследования и в день забора крови исключить жирную пищу. Факторы, влияющие наРБТЛ: Снижают:цитостатики, иммунодепрессанты, кортикостероиды, облучение ионизирующей радиацией.

• 
  Слайд 6

  Спонтанная РБТЛ

  суспензию спленоцитов (5 х 10 кл./мл) на "среде культивирования" разливают в 96-луночную панель по 200 мкл в лунку (по три лунки на каждый образец) и инкубируют в СО-инкубаторе (5% СО) при температуре 37 град.С в течение 72 ч. добавляют Н-тимидин в объеме 25 - 50 мкл в среде RPMI-1640 на лунку и инкубируют в тех же условиях еще 16 - 24 ч. по окончании инкубации клетки переносят на фильтры, фильтры после сушки в термостате помещают во флаконы, содержащие по 3 мл сцинтилляционной жидкости (на 1 л толуола 0,2 г РОРОР и 5 г РРО).

• 
  Слайд 7

  РБТЛ под влиянием митогенов

  Постановку РБТЛ под влиянием митогенов осуществляют так же, как спонтанную, только в опытные лунки добавляют Т- или В-клеточныемитогены (не менее 3 лунок на каждый митоген) в оптимальной стимулирующей дозе (КонА 1 - 15 мкг/мл, ФГА 10 - 15 мкг/мл, ЛПС 15 - 100 мкг/мл). Контролем служат лунки с взвесью лимфоцитов без добавления митогенов.

• 
  Слайд 8
  

  Некоторые митогены селективно стимулируют различные субпопуляции лимфоцитов. Например, КонА стимулирует тимоциты, зрелые и незрелые Т-клетки, ФГА стимулирует пролиферацию только зрелых Т-клеток. Такие митогены, как липополисахарид и бактериальный липопротеин, стимулируют пролиферацию В-клеток. Благодаря этой селективности митогены могут использоваться для характеристики функционального состояния различных субпопуляцийиммунокомпетентных клеток.

• 
  Слайд 9

  Учёт результатов

  Радиоактивность (имп./мин.) образцов измерить с помощью бета-счетчика. Учет реакции можно проводить визуально, определяя процент бластных форм лимфоцитов. Результаты представляют в виде индексов стимуляции клеток (ИСК), которые подсчитывают по формуле: имп./мин. в культуре с митогеном ИСК = ------------------------------------------------ имп./мин. в культуре без митогена

• 
  Слайд 10

  Расшифровка анализов

  РБТЛ с ФГА Повышение:гиперактивность иммунной системы при аллергических и аутоаллергических заболеваниях, активация антитрансплантационного иммунитета, острый период первичной инфекции, иммунный ответ на тимусзависимые антигены. Снижение: онкологические заболевания, вторичные иммунодефициты, первичные иммунодефициты, СПИД, тяжёлые вирусные инфекции, тяжёлые ожоги, травмы.

• 
  Слайд 11
  

  РБТЛ с антигеном: Наличие пролиферативного ответа лимфоцитов на определенный антиген даёт представление о наличии и выраженности специфической сенсибилизации организма.