Презентация на тему "Технология Рекомбинантных Днк."

Содержание

• 
  Слайд 1

  Технология Рекомбинантных Днк.

  Подготовила: Кинжибаева Ж., 1270112гр. Проверила: Селеуова Л.А., преподаватель

• 
  Слайд 2
  

  Рекомбинантная ДНК – гибридная молекула ДНК, содержащая искусственно введенный ген.

• 
  Слайд 3
  

  Механизм создания рекомбинантной ДНК 1. Рестрикция — разрезание ДНК рестрикционнойэндонуклеазой (рестриктазой) на множество различных фрагментов, но с одинаковыми «липкими» концами. Такие же концы получают при разрезании плазмидной ДНК той же рестриктазой.

• 
  Слайд 4
  

  2. Лигирование — включение фрагментов ДНК в плазмиды благодаря «сшиванию липких концов» ферментом лигазой. 3. Трансформация — введение рекомбинантныхплазмид в бактериальные клетки, обработанные специальным образом — так, чтобы они на короткое время стали проницаемыми для макромолекул. 4. Скрининг — отбор среди клонов трансформированных организмов тех, которые содержат плазмиды, несущие нужный ген.

• 
  Слайд 5
  
• 
  Слайд 6
  

  Ферменты используемые в генной инженерии: Рестриктазы- ферменты, способные узнавать специфические последовательности ДНК(4-6 нуклеотидов)

• 
  Слайд 7
  

  Ревертаза- фермент, синтезирующий ДНК по матрице РНК

• 
  Слайд 8
  

  3. ДНК- полимераза – синтезирует нуклеиновые кислоты. 4. Терминальная трансфераза – наращивает на концах фрагмента ДНК однонитевые участки путем последовательного присоединения нуклеотидов; используется для создания на соединяемых фрагментах ДНК «липких» концов. 5. Нуклеазы – большой класс ферментов, расщепляющих молекулы нуклеиновых кислот; имеются нуклеазы, расщепляющие одно- или двуцепочные ДНК и РНК путем отщепления по одному нуклеотиду или небольших олигонуклеотидов.

• 
  Слайд 9
  

  Методы получения трансгенных животных Микроинъекция клонированных генов производят в один или оба пронуклеуса только что оплодотворенной яйцеклетки мыши. Чаще выбирают мужской пронуклеус, привнесенный сперматозоидом, так как его размеры больше. После инъекции яйцеклетку немедленно имплантируют в яйцевод приемной матери, или дают возможность развиваться в культуре до стадии бластоцисты, после чего имплантируют в матку.

• 
  Слайд 10
  
• 
  Слайд 11
  

  Вирусный метод: Эмбрион находящийся на стадии 8 клеток, инфицируют рекомбинантным ретровирусом, несущий трансген. Самки, которым был импортирован эмбрион, производят на свет трансгенноепотомство.для идентификации мышей, несущих трансген в клетках зародышей линии, проводят ряд скрещиваний.

• 
  Слайд 12
  

   Клонирование овцы методом переноса ядра. Эпителиальные клетки молочной железы в культуре индуцируют для перехода в фазу G0 (стадия, на которой находится яйцеклетка). Затем осуществляют слияние такой клетки с энуклеированной яйцеклеткой и выращивают эмбрионы до ранних стадий эмбриогенеза. После чего эмбрионы имплантируют в матку суррогатной матери, где происходит дальнейшее развитие. В экс.Я. Уилмута (I. Wilmut) по клонированию Долли было проведено 277 слияний безъядерных яйцеклеток с клетками молочной железы в фазе G0, из 29 выживших эмбрионов только один развился до жизнеспособного организма 

• 
  Слайд 13
  

  Спасибо за внимание!!