Презентация на тему "Микроинъекция вирусных молекул ДНК"

Содержание

• 
  Слайд 1

  микроИНЪЕКЦИЯ ВИРУСНЫХ МОЛЕКУЛ ДНК.

  Работу выполнила студентка ДРЭ-41 Штефанова Ольга

• 
  Слайд 2
  

  Метод микроинъекции вирусных молекул ДНК является одним из методов введения рекомбинантных ДНК в клетки. Впервые данный метод был воспроизведен в 1970 году А. Грессманом при введении молекул ДНК в культивируемые клетки млекопитающих.

• 
  Слайд 3
  

  Метод микроинъекции вирусных молекул ДНК относится к методам трансгенеза, т.е. искусственного введения в геном дополнительной информации (трансгена) и широко распространен в животноводстве.

• 
  Слайд 4
  

  Процесс заключается во введении в клетку (цитоплазму или ядро) малых объемов жидкости с помощью стеклянного микрокапилляра. Эксперимент проводится на предметном столике микроскопа с применением микроманипуляторов и микрошприцев.

• 
  Слайд 5
  

  Использую эту методику, удалось изучить биологическую активность молекул ДНК разных вирусов. К достоинствам метода относится то, что определенное количество препарата ДНК можно ввести в выбранную область клетки, в частности в ядро. Недостатком является его сложность и невысокая производительность.

• 
  Слайд 6
  

  Метод микроинъекции вирусных ДНК применим к небольшим молекулам ДНК, так как при продавливании через микрокапилляр целостность больших молекул ДНК будет нарушаться вследствие гидродинамического сдвига. В силу отмеченных недостатков метод микроинъекции ДНК используется крайне редко.

• 
  Слайд 7
  

  В животноводстве:суть метода заключается во введении раствора генных конструкций в мужской пронуклеус зигот. Степень интеграции, то есть число трансгенных животных от общего числа родившихся животных, при использовании метода микроинъекции в зависимости от вида животных колеблется в незначительных пределах. Так, у мышей этот показатель в среднем составляет 15%, у свиней - 10-15%, у кроликов - 10%, у овец, коз и коров - 5-10%.

• 
  Слайд 8
  

  Следует отметить, что на частоту интеграции при использовании метода микроинъекции оказывают влияние такие факторы, как степень очистки инъекционного раствора, форма и концентрация ДНК, состав буферного раствора для микроинъекции, качество эмбрионов, а также способ пересадки эмбрионов реципиентам.

• 
  Слайд 9
  

  Микроинъекции производятся в пронуклеус оплодотворенного яйца. При таком способе обычно множество молекул ДНК, организованных в тандемы типа голова-к-хвосту ("headtotail", конец одной молекулы пристраивается к началу другой) ассоциируют перед интеграцией путем рекомбинаций и встраиваются в одно и тоже место на хромосоме. Принципиальное преимущество микроинъекций в том, что они позволяют эффективно создать трансгенные животные, но их серьезные недостатки: нельзя вводить гены в клетки на более поздних стадиях, в процессе интеграции происходит множество перегруппировок, в геноме оказывается множество копий встраиваемой ДНК, и, наконец, интеграция происходит в произвольное место генома случайным образом.