Презентация на тему "Геном и геномные библиотеки"

Содержание

• 
  Слайд 1

  Геном и геномные библиотеки

• 
  Слайд 2
  
• 
  Слайд 3

  Основные стадии технологии создания геномной библиотеки

• 
  Слайд 4
  

  1 - линеаризация ДНК вектора рестриктазойBamHI; 2 - расщепление линеаризованной ДНК вектора рестриктазойEcoRI с образованием "плечей"; 3 - введение в вектор клонируемого EcoRI-фрагмента ДНК Искусственная хромосома дрожжей со вставкой 100-700 т.п.н. Искусственная мини-хромосома дрожжей (пока без истинных генов, кодирующих белки). Электронная микроскопия

• 
  Слайд 5

  Введение рекДНКв клетку

• 
  Слайд 6
  
• 
  Слайд 7
  

  Схема строения пептидогликана бактерий (муреиновый мешок) остов из N–ацетилмурамовой кислоты (MypNAц) и N–ацетилглюкозамина (ГлюNAц); боковые пептиды, состоящие из L–аланина (L–Ала), D–глутамата (D–Глу), L–лизина (L–Лиз) и D–аланина(D–Ала); пептидные (Гли5) поперечные мостики. Модель бактериальной (прокариотической) клетки, созданная на основе электронной микроскопии

• 
  Слайд 8

  Структура клеточной стенки бактерий (схема)

  Грамположительных (Gr+) Грамотрицательных (Gr-)

• 
  Слайд 9
  

  Для бактерий наиболее оптимальным способом доставки рекДНК являются БАКТЕРИОФАГИ (применение ограничено из-за лизиса клетки-хозяина)

  Инфицирование фагом λ клетки E.coli

• 
  Слайд 10
  
• 
  Слайд 11

  Схематическое изображение фагоцитоза эукариотической клетки

  Химическая обработка клеток Конц. СаСl2 + 42°С, 1,5 минут

• 
  Слайд 12

  Метод электропорации

  Высоковольтные импульсы (напряжение 200 - 350 В, длительность импульса 54 мс)приводят к образованию пор (электропробой) в цитоплазматической мембране

• 
  Слайд 13

  Электропорация.

  Появление пор в липидном бислое в результате воздействия импульсного электрического поля. Диаметр пор сост. десятки нанометров, соизмерим с размером рекДНК Электронная микрофотография клеток после электропорации

• 
  Слайд 14

  УЗ порация

• 
  Слайд 15
  

  Биохимический метод увеличения проницаемости клеточных стенок.Основан на использовании ферментов, обратимо разрушающих клеточную стенку

• 
  Слайд 16

  Схема строения клеточной стенки грамположительных бактерий

• 
  Слайд 17

  Схема строения клеточной стенки грамотрицательных бактерий

• 
  Слайд 18
  

  фотография клеточной стенки дрожжевой клетки У дрожжейклеточные стенки состоят из β-глюканов и частично фосфорилированных маннатов Комплексный дрожжелитический препарат - ферменты фосфоманназа, β-глюканаза-1,3

• 
  Слайд 19
  

  – клеточная стенка состоит из α- и β-глюканов, гликопротеидов и хитина. Для их разрушения используют комплексный дрожжелитический препарат, содержащий ферменты - фосфоманназу, - β-глюканазу-1,3 или -1,6, - хитиназу Плесневые (низшие) грибы

• 
  Слайд 20

  Введение чужой ДНК в клетку путем микроинъекции

  Только в крупные соматические клетки (неполовые) многоклеточных организмов

• 
  Слайд 21

  Липосома. Схема

  Трансфоормациялипосомами. Биологические мембраны ( цитоплазматические клеточные). СХЕМА

• 
  Слайд 22

  Технология липосом

• 
  Слайд 23
  

  Метод биологической баллистики