Презентация на тему "Определение активности лактатдегидрогеназа в крови"

Содержание

• 
  Слайд 1
  

  ЛактатДегидроГеназа

• 
  Слайд 2
  

  Лактатдегидрогеназа – относится к классу оксидоредуктаз.

  Оксидоредуктазы катализируют ОВР.

  ЛДГ – цитоплазматический цинксодержащий гликолитический фермент, обратимо катализирующий восстановление пировиноградной кислоты (пируват) в молочную кислоту(лактат) в процессе окисления глюкозы и образования молочной кислоты.

  ПИРУВАТ +НАД(Н)  ЛАКТАТ +НАД

• 
  Слайд 3
  

  Фермент широко распространен в организме человека. По степени убывания активности фермента органы и ткани располагаются в следующем порядке: почки, сердце, скелетные мышцы, поджелудочная железа, селезенка, печень, легкие, сыворотка крови.

• 
  Слайд 4
  

  ЛДГ имеет 5 изоферментов, представляющих различные комбинации из четырех субъединиц двух основных типов – Н(сердце) и М(мышцы) по названию органов, где обнаружена их наибольшая активность, которые обозначают цифрами от 1 до5 : ЛДГ1,ЛДГ2,…..ЛДГ5.

• 
  Слайд 5
  

  В составе изофермента может быть 4 субъединицы типа Н(4Н) НННН;

  • В другом 3 субъединицы Н и одна М(3Н1М) НННМ
  • В 3м – 2 субъединицы Н и 2 субъединицы М(2Н2М) ННММ;
  • В 4м – 1 субъединица Н и 3 М(1Н3М) НМММ
  • В 5М – четыре субъединицы М(4М) ММММ
• 
  Слайд 6
  

  В тканях с преимущественным аэробным обменом веществ (мозг, сердце, почки) наибольшей активностью обладают

  • ЛДГ1 и ЛДГ2;
  • В тканях с выраженным анаэробным обменом веществ (печень, легкие, скелетная мускулатура, и др.) преобладают ЛДГ4 и ЛДГ5.
  • Изофермент ЛДГ1 активен при низкой концентрации пирувата и ингибируется его избытком, ЛДГ5 активен при высоких концентрациях пирувата. ЛДГ1 происходит в основном из сердца, а ЛДГ5 – из печени.
• 
  Слайд 7
  

  • ЛДГ1 обладает устойчивостью к действию мочевины. ЛДГ содержится не только в сыворотке , но и в эритроцитах, поэтому сыворотка для анализа должна быть свежей, без следов гемолиза.
  • Исследование общей активности фермента характеризует интенсивность ОВР организма, определение активности отдельных изоферментов ЛДГ способствует диагностике некоторых заболеваний сердца, печени и др. органов
• 
  Слайд 8
  

  Существуют следующие методы определения общей активности ЛДГ в сыворотке крови:

  Колориметрические :

  • Динитрофенилгидразиновые методы основаны на определении количества ПВК (продукт реакции) при помощи 2,4-ДНФГ (унифицированный метод)
  • Редоксиндикаторные методы основаны на превращении бесцветной окисленной формы тетрозолиевых солей в окрашеную форму за счет окисления восстановленного молочной кислотой НАДН.
• 
  Слайд 9
  

  Спектрофотометрические – основаный на различии спектров поглощения окисленной и восстановленной формой НАД.

  Принцип метода:

  ЛДГ катализирует превращение лактата в пируват при одновременном восстановлении НАД в НАД(Н) , которые далее восстанавливает в присутствии п-метилфеназонийметилсульфата йоднитротетразониевой фиолетовый в красный формазан.

• 
  Слайд 10
  

  Одновременно с определением общей каталитической активности ЛДГ можно определить долю фермента, устойчивого к действию мочевины, что характерно для изофермента сердечной фракции.

  НАД(Н)+йоднитротетрафиолет+N- метил-Ф. красный формазан+НАД

• 
  Слайд 11

  КДЗ

  В норме основным источником ЛДГ в сыворотке крови являются разрушенные клетки крови. При повреждении тканей фермент поступает в кровь.

  Активность общей ЛДГ возрастает при повреждении миокарда, лейкозах, почечных заболеваниях, гемолитической, серповидноклеточной анемиях, тромбоцитопениях, инфекционных мононуклеозах, а также прогрессивной мышечной дистрофии.

• 
  Слайд 12
  

  Все заболевания, протекающие с некрозом тканей(инфаркт миокарда, некротические поражения почек, гепатиты, панкреатиты, опухоли)как правило, сопровождаются резким повышением активности ЛДГ в сыворотке крови.

• 
  Слайд 13
  

  Увеличение активности ЛДГ1-ЛДГ2:

  • Инфаркт миокарда, анемия
  • Острые поражения почечной ткани
  • Опухолевые заболевания яичников
  • Увеличение активности ЛДГ3-ЛДГ4:
  • Массивные разрушения тромбоцитов и вовлечение в патологический процесс лимфатической системы.

  Увеличение активности ЛДГ5:

  - Повреждение скелетных мышц, воспалительные заболевания мышц, печени (гепатиты, цирроз), раковые опухоли.

• 
  Слайд 14
  

  Увеличение общей ЛДГ:

  • Вирусный гепатит, шок, гипоксия, обширные опухолевые процессы, циррозы, обтурационная желтуха, заболевания почек, опорно-мышечного аппарата.
  • Нормальные показатели ЛДГ в сыворотке крови: 0,65-2,60 мккат/л

  Доля устойчивого к действию мочевины фермента (сердечная фракция) – 60-80%

• 
  Слайд 15
  

  • Вопросы
  • Тесты
• 
  Слайд 16
  

  • К какому классу ферментов относится ЛДГ?
  • В каких органах содержится фермент?
  • Как различаются ферменты ЛДГ?
  • Где преимущественно содержится ферментЛДГ1?
  • Где преимущественно содержится ферментЛДГ5?
  • Какая фракция стабильна к мочевине ?
  • Какими субъединицами представлен фермент ЛДГ?
  • Какими методами можно определить активность ЛДГ?
  • Почему при проведении анализа надо использовать свежую сыворотку?
• 
  Слайд 17
  

  № мышечной фракции ЛДГ

  • 33 – 75
  • 30 – 50
  • 52 – 83
  • 42 – 80

  На сколько % снижается активность ЛДГ через сутки?

  • 5%
  • 20%
  • 10%
  • 2%

  При какой температуре можно хранить исследуемую пробу?

  Комнатной

  • 37
  • -10
  • 0

  Какими субъединицами представлен фермент ЛДГ?

  • М
  • Н
  • В

  Какие методы более унифицированы?

  Спектрофотометрические

  Колориметрические

  Какие изоферменты определяются при массивной гемотрансфузии

  • ЛДГ 5
  • ЛДГ 3
  • ЛДГ 1
  • ЛДГ 2

  Какой элемент из тяжелых металлов содержит фермент ЛДГ?

  • Cu
  • Zn
  • Pb

  Какой фактор влияет на получение достоверного ответа?

  Гемолиз эритроцитов

  Изменение температуры на 2 градуса

  Действие ингибиторов

  Выберите сердечную фракцию ЛДГ

  • ЛДГ 2
  • ЛДГ 1
  • ЛДГ 4
  • ЛДГ 5

  Чем характеризуется фермент ЛДГ?

  • Изофермент
  • Обладает обратимостью действия
  • Оксидоредуктаза
  • Органоспецифичность
  • Все ответы верны