Презентация на тему "Трансгенез. Животные"

Презентация: Трансгенез. Животные
Включить эффекты
1 из 33
Ваша оценка презентации
Оцените презентацию по шкале от 1 до 5 баллов
  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 5
4.1
4 оценки

Комментарии

Нет комментариев для данной презентации

Помогите другим пользователям — будьте первым, кто поделится своим мнением об этой презентации.


Добавить свой комментарий

Аннотация к презентации

Презентационная работа по биологии на тему: "Основы биотехнологии. Трансгенез. Животные", адресованная студентам. Автор рассказывает об этапах и схемах получения трансгенных животных, а также целях этого направления в науке.

Краткое содержание

  • Словарь
  • Трофобласт
  • Этапы получения трансгенных животных
  • Схемы получения трансгенных животных
  • Основные проблемы
  • Способы введения днк в культивируемые клетки животных
  • Основные стратегии в трансгенезе животных
  • Схема получения библиотеки кДНК

Содержание

  • Презентация: Трансгенез. Животные
    Слайд 1

    ОСНОВЫ БИОТЕХНОЛОГИИ

    ТРАНСГЕНЕЗ. ЖИВОТНЫЕ.

    Лекция 7

  • Слайд 2

    Словарь

    • Зигота – тотипотентная диплоидная клетка, образующаяся в результате оплодотворения (слияния яйцеклетки и сперматозоида)
    • Бластоциста– зародышевый пузырек, ранняя (преимплантационная) стадия развития зародыша млекопитающих (в том числе человека
  • Слайд 3

    Что означает термин «трансгенные животные»?

  • Слайд 4

    humbio.ru

    Трофобласт– наружный клеточный слой бластоцисты млекопитающих, принимает участие в имплантации и формировании плаценты

    Синцитиотрафобласт – выполняет функцию всасывания питательных веществ из крови матери, вырабатывает ферменты, способствующие внедрению ворсин хориона в ткани матки

  • Слайд 5

    1. Оплодотворенная яйцеклетка (зигота) 2. Зигота делится надвое 3-4. Митотическое деление продолжается 5. Через 5-6 дней образуется бластоциста 6. Внутреннюю часть бластоцисты (ВКМ) помещают на питательную среду для получения стволовых клеток

  • Слайд 6

    Этапы получения трансгенных животных(до принятия решения об интродукции)

    • Создание и амплификация rДНК (кассета экспрессии+вектор)
    • Выбор и подготовка клеток-реципиентов для трансформации
    • Встраивание трансгена в геном клетки-реципиента
    • Отбор трансгенных организмов
    • Отбор трансгенных организмов, образующих трансгенные гаметы
    • Получение чистых линий
    • Оценка экспрессии гена
  • Слайд 7
    • В 1982 году Р.Д.Пальмитер с коллегами опубликовали фотографию, на которой рядом сидели две мыши. Одна из них была трансгенной, в ее ДНК встроили ген гормона роста крысы, другая была обычной мышкой.
    • Металлотионеин - белок, способный связывать двухвалентные металлы. Регулирует концентрацию в клетке микроэлементов (цинк и медь).
  • Слайд 8

    Схемы получения трансгенных животных

    Микроинъекция в зиготу микроинъекция чужеродной ДНК в оплодотворенную яйцеклетку (зиготу)

    1. Создание и клонирование кассеты экспрессии составе вектора клонируется в E. Coli

    2. Получение одноклеточных зигот

    3. ВыделяниеrДНК, переведение в линеарную форму, инъецирование в пронуклеус зиготы.

    4. пересадка эмбрионов самкам-реципиентам

    5. отбор трансгенных животных, продуцирующих трансгенные гаметы

  • Слайд 9

    1. встроился ли трансген в геном?

    2. несут ли трансген гаметы?

    3. экспрессируется ли трансген?

    Основные проблемы

  • Слайд 10

    Схема введения генов и установления гомозиготной линии мышей с помощью микроинъекций

    MDR1- ген множественной лекарственной устойчивости

  • Слайд 11

    Схемы получения трансгенных животных

    Реконструкция эмбрионов с использованием ЭСК (эмбриональных стволовых клеток) микроинъекция чужеродной ДНК в ЭСК

    1. Получение культуры ЭСК

    2. Введение в ЭСК rДНК с селективных маркером (с помощью ретровирусов, электропорации, липосом)

    3. Получение бластоцист для микроинъекции

    4. Конструирование химерных эмбрионов

    5. Пересадка эмбрионов самкам-реципиентам

    6. отбор трансгенных животных, продуцирующих трансгенные гаметы

  • Слайд 12

    Инъекция в бластоцисту

  • Слайд 13

    Способы введения днк в культивируемые клетки животных

    • Рекомбинантные РНК-вирусы
    • Клетка с помощью рецепторов опознает вирусную оболочку.
    • Вирус внедряет в клетку РНК.
    • В клетке РНК с помощью ревертазы переписывается в ДНК
    • ДНК проникает в ядро соматической клетки.
    • ДНК встраивается в ДНК клетки.
    • Клетка синтезирует копии обновленного генома и мРНК.
    • Белки транслируются
    • РНК вируса одеваются вирусной оболочкой выходят из клетки, заражая новые поколения клеток.
    • Перенос генов с помощью вирусов (Эффективные векторы созданы на основе ретровирусов, вирусов SV40, аденовирусов, аденоассоциированных вирусов, вируса осповакцины, вируса герпеса и др.)

  • Слайд 14

    Структура экспрессирующего вектора pKSV-10 для трансгенеза животных рисунок из книги Л.И. Патрушева Экспрессия генов, 2004

  • Слайд 15

    Способы введения днк в культивируемые клетки животных

    Перенос генов, опосредованный клеточными рецепторами основан на интернализации рецепторов в процессе эндоцитоза

  • Слайд 16

    Электропорация.

    Кратковременное (10 мксек-100 мсек) воздействие электрическим полем высокой напряженности (50-1500 V/см), вызывает локальное нарушение целостности мембран с образованием микропор (диаметр 20-120 нм), через которые заряженные молекулы, в том числе и ДНК, как линейная, так и суперскрученная, проникают внутрь клеток

  • Слайд 17

    Основные стратегии в трансгенезе животных. Внедрение в практику.

    Создание новых животных, с улучшенными качественными и количественными характеристиками

    (лосось с трансгеном гормона роста)

  • Слайд 18
    • Создание новых животноводческих пород, дающих продукты с повышенным содержанием некоторых компонентов (например, в Великобритании существует стадо коров, молоко которых подходит для приготовления сыра чеддер).
  • Слайд 19

    Создание животных, способных продуцировать несвойственные их виду белки (например, сообщалось о получении свиней, способных продуцировать интерферон человека).

  • Слайд 20

    Создание трансгенных животных, являющихся донорами при трансплантациях органов.

    (например, из стволовых эмбриональных клеток животных вырастили глаза и уши лягушки).

  • Слайд 21

    Получение геномных библиотек – полное собрание генома человека, распределенное по отдельным «томам» рекомбинантных молекул плазмид или фаговыхчастиц «в суперобложке» бактерии E.coli.

  • Слайд 22

    Схема получения геномной библиотеки. Метод дробовика

  • Слайд 23

    Схема получения библиотеки кДНК

  • Слайд 24

    ДНК-зонды

    ДНК-зонд (англ. DNA probe) – фрагмент ДНК, меченный тем или иным образом и использующийся для гибридизации со специфическим участком молекулы ДНК. Позволяет идентифицировать комплементарные ему нуклеотидные последовательности.

  • Слайд 25

    ДНК-зонды.

    Зонды с комплементарными концевыми последовательностями (molecularbeacons)

    Зонды с резонансным переносом энергии (LightCyclerassay)

    Концевые последовательности зонда комплементарны и образуют шпильки, что гасит свечение. Зонды, которые отжигаются на матрицу, разворачиваются, и флуоресцентная метка и гаситель расходятся в разные стороны - увеличивается свечение.

    Принцип метода в переносе энергии от одного флуорофора (на 3` конце первого зонда), ко второму флуорофору (на 5` конце второго зонда). При связывании зондов с ДНК матрицей испускаемое первым флуорофором излучение передается на второй флуорофор, а его излучение детектируется прибором.

  • Слайд 26

    Схема получения кДНК.

  • Слайд 27

    Генная терапия

    в генной терапии наследственных болезней применяют векторные системы на основе:

    • лентивирусов
    • аденовирусов
    • аденоассоциированных вирусов
    • ортопоксвирусов
    • герпесвирусов
    • РНК-вирусов, не относящихся к ретровирусам

  • Слайд 28

    Сравнение свойств генотерапевтических векторных систем

  • Слайд 29

    Словарь

    • Таргетинг (target - мишень) – изменение генов за счет гомологичной рекомбинации последовательностей, находящихся в хромосоме, с искусственно введенными в клетку последовательностями ДНК
    • Упаковывающая клетка – линия клеток, созданная для продуцирования (упаковки) вирусных частиц, не содержащих инфекционных нуклеиновых кислот.
  • Слайд 30

    Схема переноса генов с использованием ретровирусных векторов

    1. Клонирование гена в ДНК ретровирусного вектора в клетках E.coli.

    2. Перенос ДНК ретровирусного вектора в упаковывающие клетки.

    3.Формирование ретровирусных частиц и их выход в культу реальную среду.

    4. Трансдукция гена в составе ретровирусного вектора в клетки-мишени.

  • Слайд 31

    Методы модификации вирусов

    • физический таргетинг– покрытие вирусной частицы специальной оболочкой, изменяющей ее природный тропизм и делающей ее неузнаваемой для иммунной системы человека
    • генетическая модификация вируса – модификация белков оболочки вектора
    • транскрипциональныйтаргетинг– введение в трансген-экспрессирующую кассету специфических для данных тканей промоторных последовательностей.
  • Слайд 32
  • Слайд 33

    Успехи и неудачи генной терапии

    17 сентября 2000 г. в Университете Пенсильвании умер 17 летний Джесси Гелзингер, которого пытались вылечить от наследственного заболевания печени недостаточность орнитинтранскарбомилазы (OTCD).

    Он умер из-за гиперреакцииимунной системы на ввод в печень генно-инженерного аденовируса.

    Смерть наступила вследствие острого респираторного синдрома и выхода из строя множества органов.

    Первая успешная попытка лечения тяжелого обычно несовместимого с жизнью наследственного иммунологического заболевания, вызванного дефектом в гене, кодирующем фермент аденозиндезаминазу, была осуществлена в 1990 г. В. Андерсеном с соавт.

    David Phillip Vetter

    21.09.1971, - 22.02.1984

    Джесси Гелзингер

Посмотреть все слайды

Сообщить об ошибке