Содержание
-
Транскрипция – синтез РНК по матрице ДНК
-
Все типы РНК транскрибируются с ДНК
-
-
-
Рибонклеозидтрифосфаты – субстраты для синтеза РНК
-
Нуклеозидтрифосфаты
-
Принципы транскрипции
- Комплементарность
- Антипараллельность
- Асимметричность
- Униполярность
- Матричный принцип
-
Транскрипция
- 5΄ CGATGCAT 3΄Нематричная цепь, кодирующая или смысловая ДНК
- 3΄ GCTACGTA 5΄ Матричная цепь, некодирующая или несмысловая m PHK 5΄CGAUGCAU 3΄
-
РНК транскрибируется комплементарно и антипараллельно с одной из цепей ДНК
-
Эксперимент, доказывающий, что транскрипция идет с одной цепи ДНК
-
Разные гены могут транскрибироваться с одной и другой цепи ДНК
-
Транскрипция у прокариот
-
РНК-полимераза E.coli
- Белок с четвертичной структурой
- Holo-фермент (полный) состоит из 5 субъединиц –ααββγ. Без γ – это core-фермент. γ узнает расплавленные области промотора. Holo-фермент связывается с промотором и начинает транскрипцию после этого γ уходит и далее элонгацию осуществляет core-фермент
-
В β субъединице находятся 2 каталитических центра, один отвечает за инициацию, а другой за элонгацию. Один работает в Holo-ферменте а другой – в core-ферменте
-
Бактериальная РНК-полимераза
-
Оперон
-
-
Оператор
-
Терминация
-
Теория оперона
- Ф. Жакоб и Ж. Мано 1961 год
- Оперон – это группа генов, функции которых тесно связаны в метаболизме. Оперон весь либо активен, либо не активен. Если оперон активен, с него транскрибируется полицистронная мРНК, служащая матрицей для синтеза всех белков оперона.
-
Промотор – РНК-полимераза узнает в промоторе два АТ-богатых расплавленных участка , центры их -10 и -35п. н., а между ними 16-19 п. н. (если меньше или больше, РНК-полимераза не узнает промотор)
-
Этапы транскрипции
- Узнавание и прочное связывание РНК-полимеразы с промотором. Если оператор свободен, то в β субъединице оказывается первый нуклеотид оперона и при этом плавится один виток двойной спирали ДНК – 10 п.н. Образуется транскр глазок
- Инициация – образование фосфодиэфирной связи между 1 и 2 нуклеотидом. Первый всегда пурин трифосфат σ покидает фермент
-
- Элонгация – наращивание цепи РНК
- Core фермент покрывает 40 п. н. при этом плавления спирали не происходит, но зато В-форма ДНК превращается в А-форму с пустотой внутри 0,5 нм, что облегчает транскрипцию. Водородные связи разрываются на участке не более 6 п. н.
- Терминация
-
Lac-оперон
- Если в среде глюкозу заменить лактозой, то через некоторое время E. coli начинают синтезировать 3 фермента, обеспечивающих метаболизм лактозы.
- В отсутствие лактозы репрессор ( аконитаза) связан с оператором, перекрывающим промотор, и транскрипция не идет.
- При появлении лактозы, она связывается с репрессором, оператор освобождается и начинается транскрипция оперона
-
Триптофановый и гистидиновый опероны
- В присутствии солей аммония как источника азота E. coli синтезирует все АМК. При добавлении в среду Три или Гис перестает синтезировать именно эти АМК.
- Это связано со структурой корепрессора, который не имеет сродства к оператору, но приобретает его после присоединения АМК и тогда он присоединяется к оператору и запрещает транскрипцию
-
Оперон
Оперон – единица транскрипции у прокариот, с него считывается 1 молекула РНК Промотор – в начале оперона, в конце – терминатор, а между ними Цистроны-последовательность ДНК, кодирующая 1полипептид или 2 РНК Промотор – площадка для посадки РНК-полимеразы Терминатор- сигнал к окончанию Транскрипции
-
Оператор
Оператор - регуляторный участок оперона. С ним связывается белок-репрессор и останавливает транскрипцию
-
Готовность к транскрипции
- Ремоделирование нуклеосом strip, split,flip?
- Деконденсация доменов
- Гиперацетилирование гистонов и появление чувствительности к ДНК-азе I
- Уменьшение или распад нуклеосом
- Превращение нуклеосом в гексасомы
- Территория хромосомы – неактивные гены внутри, а активные по периферии
-
Бактериальный промотор
-
Мотивы бактериальных промоторов
-
Инициация
-
Элонгация
Элонгация – последовательное наращивание цепи РНК. При этом необходим разрыв водородных связей. В это время работает core-фермент. Он сначала переводит В форму в А, в которой есть внутренняя пустота, облегчающая элонгацию, разрыв водородных связей происходит на очень небольшом участке – 6 п.н.
-
Терминация
Терминация - в терминаторе имеются Г-Ц богатые участки – палиндромы.Дойдя до палиндрома, РНК-полимераза не останавливается, а считывает его. После этого копия палиндрома в РНК складывается в шпильку а фермент сваливается с ДНК
-
Транскрипционная единица эукариот
-
-
-
Инициация транскрипции у эукариот
-
Разнообразие РНК-полимераз в эукариотических клетках
-
Структура эукариотического промотора
-
Терминация транскрипции
-
Грибы, Amanita, содержащие яд Аманитин, останавливающий Транскрипцию РНК-полимераза II –очень чувствительна, III – менее, I - нечувствительна
Нет комментариев для данной презентации
Помогите другим пользователям — будьте первым, кто поделится своим мнением об этой презентации.