Презентация на тему "Последовательность событий в химическом синапсе после активации пресинаптического окончания"

Включить эффекты
1 из 34
Смотреть похожие
Ваша оценка презентации
Оцените презентацию по шкале от 1 до 5 баллов
  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 5
0.0
0 оценок

Рецензии

Добавить свою рецензию

Аннотация к презентации

Посмотреть и скачать бесплатно презентацию по теме "Последовательность событий в химическом синапсе после активации пресинаптического окончания". pptCloud.ru — каталог презентаций для детей, школьников (уроков) и студентов.

  • Формат
    pptx (powerpoint)
  • Количество слайдов
    34
  • Слова
    другое
  • Конспект
    Отсутствует

Содержание

  • Последовательность событий в химическом синапсе после активации пресинаптического окончания
    Слайд 1

    Последовательность событий в химическом синапсе после активации пресинаптического окончания

    Подготовка везикул к экзоцитозу Деполяризация в результате прихода ПД Открытие Са2+-каналов Увеличение концентрации Са2+ до 10-100 мкМ (50-300 нМ в покое) Запуск экзоцитоза - слияние везикулы с мембраной (через 60 мкс после 4) Выделение медиатора в синаптическую щель Связывание медиатора в рецепторами Открытие (иногда закрытие) ионных каналов Генерация (или прекращение) ионных токов (через 150 мкс после 2) Рециклирование (возвращение) везикул в цитоплазму терминали

  • Слайд 2

    Стадии экзоцитоза медиатора из синаптических везикул

    Транспорт(мобилизация, англ., trafficking) вновь синтезированных везикул из перикариона в синапс осуществляется посредством антероградного транспорта. В пресинаптической терминали формируются функциональные субпопуляции (пулы) везикул: Неподготовленные (англ., unprimed) (их называют также рециклированные, англ., recycling) - большая популяция везикул, которые находятся в пространстве терминали и пополняют резервный пул (2). Этот пул формирует депо и может быть задействован во время периода массированной стимуляции или при нарушении процессов восстановления и рециклирования везикул. Резервные (англ., reserve) – популяция везикул, которые не полностью готовы к высвобождению медиатора, но могут быстро пополнить пул 3. Готовые к высвобождению медиатора (англ., readily releasable) – те везикулы, которые полностью пристыкованы к плазматической мембране и готовы для быстрого Са2+-зависимого высвобождения медиатора. Этот пул включает относительно небольшое число везикул.

  • Слайд 3

    Функциональные субпопуляции (пулы) синаптических везикул Three vesicle pools a) The classic three-pool model. The reserve pool makesup ~80–90% of the total pool, and the recycling pool is significantly smaller (~10–15%).The readily releasable pool (RRP) consists of a few vesicles (~1%) that seem to be docked and primed for release. b) Three kinetic components of release (indicating release of threevesicle pools) on depolarization of goldfish bipolar cells. The cell was stimulated in thepresence of the styryl dye FM 1-43, and the increase in fluorescence gives a directmeasure of exocytosis.

  • Слайд 4
  • Слайд 5

    Стадии экзоцитоза медиатора из синаптических везикул

    Специальный процесс контроля (англ., targeting) с участием малых G-белков rab-семейства, обеспечивающий соответствие везикулы данному синапсу и последующее ее «правильное» (эффективное) слияние с областью освобождения медиатора на мембране. Те везикулы, которые предназначены для слияния с пресинаптической мембраной активных зон, должны быть определенным образом позиционированы на ней. С участием нитей цитоскелета и rab-белков везикула «привязывается» (англ., tethering) к пресинаптической мембране. При этом везикула прикрепляется к мембране на расстоянии более, чем половина ее диаметра (более 25 нм). В этом процессе вовлекаются специальные белки синапсины.

  • Слайд 6

    Стыковка (англ., docking) везикулы с местом освобождения медиатора в активной зоне происходит после процесса «привязывания» и представляет собой более стабильный тесный контакт везикулы с пресинаптической мембраной. Полностью пристыкованая везикула удерживается на расстоянии 5-10 нм от мембраны. Подготовка (прайминг, англ., priming) везикулы к экзоцитозу заключается в молекулярных перестройках белкового комплекса экзоцитоза, который приобретает свойство высокой чувствительности к Са2+ и готовность к слиянию с пресинаптической мембраной. Запуск экзоцитоза (англ., triggering) происходит в результате активации белка синаптотагмина (см. далее) входящим потоком Са2+. Этот белок взаимодействует с липидами мембран везикулы и пресинаптической терминали и инициирует их слияние.

  • Слайд 7

    Слияние (англ., fusion) мембран является определяющей фазой регулируемого экзоцитоза. При этом происходит локальное слияние билипидных слоев мембран клетки и везикулы в ограниченном и высоко специализированном домене активной зоны. При этом мембрана везикулы становится единым целым с мембраной клетки, и только активный механизм восстановления может вновь сформировать везикулу и возвратить ее в следующий цикл экзоцитоза.

  • Слайд 8

    Альтернативный способ выделения медиатора из синаптических везикул

    Существует альтернативная форма тесного слияния везикулы с мембраной клетки и ее рециклирования, при котором не происходит полного слияния мембран. Такой способ выделения медиатора в англоязычной литературе называют «kiss and run» («поцеловал и убежал»), при котором происходит только частичное выделение содержимого везикулы через кратковременно формируемую пору, называемой «мерцающей». Считается, что способ «поцеловал и убежал» представляет собой особую форму высвобождения медиатора при синаптической активации, когда требуется быстрый круговорот везикул, например, в центральных синапсах, где медиатор выбрасывается из небольшого числа пузырьков, но с высокой частотой.

  • Слайд 9

    Стадии экзоцитоза медиатора из синаптических везикул

    Восстановление (англ., retrieval), или так называемое рециклирование (англ., recycling) везикул происходит по механизму эндоцитоза. При этом происходит формирование вокруг везикулы клатриновой оболочки, образованной специальным белком клатрином. Отщепление мембраны пузырька от пресинаптической мембраны происходит с участием белка динамина и Са2+-зависимой ГТФазы. Предполагают две схемы рециклирования везикул: 1) прямое образование новых пузырьков после деградации клатриновой оболочки и 2) прохождение специального эндосомального процесса, в котором из мембран пресинаптическихэндосом образуются новые везикулы. Процесс рециклирования везикул происходит в течение 30-60 с, однако может происходить и быстрее.

  • Слайд 10

    Морфо-функциональная организация активных зон

    Методом электронно-микроскопичес-кой томографии на мембранах активных зон выявлена электронно-плотная упорядоченная решетка цитоматрикса из частиц конической формы, выдающихся в цитоплазму на 50 нм. Из вершин конусов частиц в цитоплазму выдаются филаментные стержни длиной около 100 нм. Элементы активной зоны образуют упорядоченную ультраструктуру, состоящую из своеобразных «стрежней» (peg), «ребер» (rib) и «пучков» (beam). SV – synaptic vesicles

  • Слайд 11

    Плазматическая мембрана активных зон включает: ионные каналы, рецепторные белки, специальные клеточные молекулы, необходимые для адгезии и выравнивания пре- и постсинаптических мембран. Потенциал-зависимые Са2+-каналы (N- и P/Q-типа) обеспечивают поток Са2+ в цитоплазму в ответ на ПД. Клеточные молекулы адгезии представлены иммуноглобулинами, интегринами и кадхеринами. Специфическими молекулами адгезии в мембранах активных зон являются - и -нейрексины. -нейрексины формируют асимметричные контакты с постсинаптическими нейролигинами, -нейрексины связаны с Са2+-каналами. Внутри активной зоны локализован также ряд различных рецепторных белков, включая метаботропные рецепторы. Активная зона и постсинаптическое уплотнение окружены лентой из белкового кадхерин/-катенин комплекса. Цитоматрикс активных зон включает несколько специфических белков, задействованных в процессы экзоцитоза и эндоцитоза синаптических везикул.

  • Слайд 12

    Функциональные молекулы мембран синаптических везикул и пресинаптической терминали, вовлеченные в процесс экзоцитоза

  • Слайд 13

    Функциональные молекулы мембран синаптических везикул и пресинаптической терминали, вовлеченные в процесс экзоцитоза

  • Слайд 14

    Функциональные молекулы мембраны синаптических везикул, вовлеченные в процесс экзоцитоза

    Протонный насос Н+-АТФазаV-типа переносит внутрь везикул Н+, поддерживая в них низкий уровень PH. Протонный градиент, направленный из синаптических везикул в цитоплазму, используется для транспорта молекул медиаторов внутрь везикул. Транспортеры медиаторов используют энергию электрохимического градиента протонов.

  • Слайд 15

    Синаптические SNARE белки и SNARE комплексы (англ., Soluble Nsf Attachment protein REceptor) связывают N-ethylmaleimide Sensitive Factor (NSF). Nsf- это белок, демонстрирующий свойство АТФазы и взаимодейст-вующий со SNARE белками. Слияние везикулы с пресинапти-ческой мембраной приводит к образованию транс SNARE комплексов, которые обеспечивают стыковку везикул с пресинаптической мембраной, притягивая мембраны друг к другу.

  • Слайд 16

    SNARE комплексы образованы тремя белками: везикулярный белок синаптобревин два белка плазматической мембраны - синтаксин и SNAP-25. Белок rab3 участвует в процессе контроля (англ., targeting).

  • Слайд 17

    Синаптофизин связывается с холестеролом и вовлечен в индукцию формирования изгиба мембраны везикулы во время ее образования. Синаптофизин образует комплекс с синаптобревином и протонной помпой. Взаимодействуя с синаптобревином, синаптофизин препятствует его включению в функциональный SNARE комплекс, обеспечивая регуляцию экзоцитоза везикул.

  • Слайд 18

    Отсутствие SV2 приводит к аномальной высокой концентрации цитоплазматического Са2+. Предполагается, что SV2 транспортирует Са2+ внутрь везикул, уменьшая вероятность экзоцитоза, чтобы сбалансировать эффект высокой синаптической активности нервной терминали. Домен N-терминали SV2 взаимодействует с Са2+-сенсором мембраны везикулы Са2+-связывающим белком синаптотагмином, регулируя его активность

  • Слайд 19

    Синапсины связаны с липидами и белками мембраны. Они взаимодействуют с белками цитоскелета. Это взаимодействие регулируется их фосфорилированием. Предполагается, что синапсины «привязывают» везикулы к нитям цитоскелета, удерживая их в резервном пуле. Синаптическая активность приводит к фосфорилированию синапсинов, в результате чего везикулы освобождаются от нитей цитоскелета, удерживающих их в резервном пуле. Это приводит к мобилизации и миграции везикул к плазматической мембране, где они потенциально готовы к экзоцитозу.

  • Слайд 20

    Функциональные молекулы мембраны пресинаптической терминали, вовлеченные в процесс экзоцитоза

    Структура SNARE комплекса Везикулярный SNARE белок синаптобревин формирует спиралевидный комплекс с белками плазматической мембраны синтаксином и SNAP-25. Са2+-связывающий белок синаптотагмин выполняет роль Са2+-сенсора мембраны.

  • Слайд 21

    Молекулярный механизм экзоцитоза медиатора

    При деполяризации мембраны в первую очередь освобождают медиатор те везикулы, которые формируют пул готовых к экзоцитозу везикул. Эти везикулы находятся в стадиях стыковки (docking), подготовки (priming) и слияния (fusion) (отмечено стрелками). SNARE комплекс в «активной» композиции приводит к тесному присоединению везикулярной и плазматической мембран, что необходимо для их слияния

  • Слайд 22

    SNARE комплекс в «активной» композиции приводит к тесному присоединению везикулярной и плазматической мембран, что необходимо для их слияния. Важным доказательном этого является открытие семи ботулинистических токсинов (A-G), которые в разных местах разрушают спиралевидные контакты между белками SNARE комплекса, блокируя синаптическое выделение медиатора.

  • Слайд 23

    Синаптотагмин является ключевым Са2+-сенсором и связывает Са2+, что необходимо для запуска слияния везикул с мембраной терминали. При связывании с Са2+синаптотагмин встраивается своей цитоплазматической частью в плазматическую мембрану и связывается с белками SNARE комплекса. После чего происходит слияние мембран и высвобождение медиатора.

  • Слайд 24

    Клатрин захватывает «пустую» везикулу, «отпочковывая» ее от плазматической мембраны. Молекулы клатрина формируют структуру, похожую на геодезический колпак. Эти структуры формируют «одетую» этим белком выпуклость мембраны (со стороны цитоплазмы), что инициирует дальнейшее захватывание везикулы внутрь терминали. Клатриновая оболочка при участии еще некоторых белков создает кривизну «захваченного» фрагмента мембраны и в конечном счете формирует полусферическое мембранное образование.

  • Слайд 25

    (1) Другой белок динамин сдавливает края мембранной полусферы, замыкая ее в «одетый» клатрином пузырек. (2) Затем клатриновая оболочка удаляется с участием АТФазы, транспортных агрегатных молекул (Hsc70), белкаауксилина (Auxilin)и белкалипидной фосфатазы (Synaptojanin). (3) Синапсин обратимо связывает везикулы с нитями цитоскелета и «привязывает» вновь образованные везикулы к цитоскелету, добавляя их в резервный пул. (1) (3) (2)

  • Слайд 26

    (1) Вновь образованные везикулы могут сливаться с внутриклеточными эндосомами по механизму экзоцитоза. (2) Образование новых везикул из эндосом, пополняющих резервный пул, происходит также как и отщепление везикул от плазматической мембраны после высвобождения медиатора (по механизму клатрин-зависимого эндоцитоза). (1) (2)

  • Слайд 27

    Synaptic vesicles partially or completely fuse with the presynaptic membrane at the active zone and release neurotransmitter into the synaptic cleft. The membrane of the fused vesicles then diffuses laterally to the areas outside the active zone where it is retrieved by clathrin-mediated endocytosis. Clathrin-coated vesicle formation involves several morphologically distinct steps, from clathrin coat binding, invagination of the coated bud, constriction and fission of the pit ‘neck’ and the subsequent stripping of the clathrin coat from the newly formed vesicle. The vesicle is then either directly transported back to the cluster of synaptic vesicles or translocated to a primary endosomal compartment. During endocytosis and migration to the release site vesicles are refilled with transmitter (NT). Model of clathrin-mediated synaptic vesicle endocytosis

  • Слайд 28

    Альтернативный способ выделения медиатора из синаптических везикул

    При частичном выделении медиатора способом «поцеловал и убежал» не происходит полного слияния пресинаптической мембраны и везикулы. Везикулы быстро рециклируются с участием динамина без клатрин-зависимого эндоцитоза. После частичного и кратковременного выделения медиатора рециклированные везикулы остаются рядом с активной зоной и могут многократно использоваться в синаптической передаче. рисунок описан на следующем слайде

  • Слайд 29

    Динамика тока, отражающего сложную кинетику высвобождения катехоламина из электронноплотной гранулы (везикулы) в хромафинной клетке крысы. Полная кинетика высвобождения определяется сложным взаимодействием поры с компонентами цитоплазмы. Описание рисунка в оригинале An amperometric signal showing the complex kinetics of catecholamine release from a large dense core granule (of a rat chromaffin cell). The overall release kinetics was determined by the complex interactions between the fusion pore and the gel matrix.

  • Слайд 30

    Разные формы экзоцитоза медиатора

  • Слайд 31

    Несинаптическое выделение медиаторов по механизму экзоцитоза

    Медиаторы могут выделяться из клеток и за пределами синаптической щели. При этом механизмы экзоцитоза могут варьировать. Такие вариации касаются особенностей мембранной поры, которую формируют везикула и плазматическая мембрана. В настоящее время обсуждаются две модели строения поры при экзоцитозе. 1) Первая модель постулирует, что пора сходна со щелевым контактом и представляет собой кольцо из белкового комплекса, соединяющего просвет везикулы с внеклеточным пространством через отверстие с полностью белковыми стенками.

  • Слайд 32

    2) Вторая модель постулирует, что кольцо из белкового комплекса сначала обеспечивает слияние липидных цитозольных листков мембран везикул и терминали. Затем сливаются другие мембранные монослои (внеклеточный листок плазматической мембраны и внутренний монослой везикулы). При этом стенки поры образованы полностью липидными молекулами. Для обеих моделей существование первичного белкового кольца исходит из предположения, что пора имеет радиальную симметрию, а белковый комплекс включает, вероятно, SNARE белки с некоторыми дополнительными ассоциированными белками.

  • Слайд 33

    Несинаптическая диффузная передача

    В отличие от синаптической, несинаптическая диффузнаяпередача в большей степени зависит от скорости диффузии медиатора в межклеточном пространстве. Несинаптическая диффузная передача может изменять состояние большой группы нейронов, обладающих несинаптическими рецепторами, чувствительными к диффундирующему медиатору. Несинаптические рецепторы для некоторых медиаторов обнаружены на мембранах различных частей нейрона. Диффузное распространение медиатора из синаптической щели на некоторое расстояние называют спиловером (англ., spillover, spill – разливаться, over - перелив).

  • Слайд 34

    Описано несколько источников сигнала диффузной несинаптической передачи. Например, транспорт глутамата, ГАМК и глицина является симметричным и может происходить в обоих направлениях. В зависимости от электрохимического градиента ионов, самих медиаторов и потенциала мембраны медиаторы могут либо поглощаться внутрь клетки, либо высвобождаться во внеклеточное пространство. Обратно направленный транспорт медиаторов обеспечивает увеличение их внеклеточной концентрации. Кроме самих нейронов глиальные клетки также обладают механизмом высвобождения медиаторов посредством экзоцитоза. Такой экзоцитоз является Са2+-зависимым процессом и может запускаться при активации глиальных рецепторов.

Посмотреть все слайды

Предложить улучшение Сообщить об ошибке