Презентация на тему "Цветные реакции белков.Качественные реакции на остатки аминокислот."

Содержание

• 
  Слайд 1

  Цветные реакции белков

  Качественные реакции на остатки аминокислот

• 
  Слайд 2

  Указатель реакций

  Биуретовая Уравнение реакции Проведение опыта Нингидриновая Ксантопротеиновая Уравнение реакции Проведение опыта Миллона Гопкинса-Коле Диазореакция Паули

• 
  Слайд 3

  Функция качественных реакций

  Для аминокислот, постоянно встречающихся в составе белков, разработано множество цветных (в том числе именных) реакций. Многие из них высокоспецифичны, что позволяет определять ничтожные количества той или иной аминокислоты. Надо помнить, что все качественные реакции – это реакции не собственно на белки, а на определенные аминокислоты, входящие в их состав.

• 
  Слайд 4

  Аминокислоты

  Основной структурной единицей белков служат a-аминокислоты. В состав большинства природных белков входит около 20 a-аминокислот. Качественные реакции служат как для определения принадлежности вещества к классу белков, так и для идентификации входящих в его состав аминокислот Наиболее распространенные аминокислоты см. таблицу

• 
  Слайд 5
  
• 
  Слайд 6

  Биуретовая реакция

  Определяет наличие пептидной связи в растворе исследуемого соединения. пептидная связь

• 
  Слайд 7

  Биуретовая реакция

  Реакция обусловлена образованием биуретового комплекса в результате соединения меди с пептидной группировкой белка. В пептидах и белках пептидная связь обычно находится в амидной форме (или кетоформе), но в щелочной среде она переходит в иминольную (енольную):

• 
  Слайд 8
  

  Биуретовая реакция протекает так: +CuSO4 +NaOH

• 
  Слайд 9

  Нингидриновая реакция

  Качественная реакция на  -аминокислоты Аминокислота с нингидрином образует продукт конденсации типа азометина

• 
  Слайд 10
  

  путем перегруппировки и гидролиза образуется 2-аминоиндандион

• 
  Слайд 11
  

  2-аминоиндандион реагирует с нингидрином и дает краситель.

• 
  Слайд 12

  Ксантопротеиновая реакция

  Определяет присутствие в белке ароматических и гетероциклических  - аминокислот: триптофана, фенилаланина, тирозина, гистидина.

• 
  Слайд 13
  

  +HNO3

• 
  Слайд 14

  Реакция Миллона

  Это реакция на аминокислоту тирозин

• 
  Слайд 15
  

  Реактив Миллона (раствор HgNO3 и Hg(NO2)2 в разбавленной HNO3, содержащей примесь HNO2) взаимодействует с тирозином с образованием ртутной соли нитропроизводного тирозина, окрашенной в розовато-красный цвет: +HgNO3 +Hg(NO2)2 +HNO3 +HNO2

• 
  Слайд 16

  Рекомендации к проведению опыта

  К 2 мл концентрированного раствора тирозина прибавляют ~1 мл реактива Миллона встряхивают осторожно нагревают пробирки на пламени спиртовки. Образуется красное окрашивание.

• 
  Слайд 17

  Реакция Гопкинса–Коле

  Эта реакция определяет аминокислоту триптофан.

• 
  Слайд 18
  

  Из глиоксиловой кислоты под действием концентрированной серной кислоты сначала получается формальдегид: СО2

• 
  Слайд 19
  

  формальдегид затем конденсируется с триптофаном: Продукт конденсации окисляется до бис-2-триптофанилкарбинола, который в присутствии минеральных кислот образует соли, окрашенные в сине-фиолетовый цвет:

• 
  Слайд 20

  Рекомендации к проведению опыта

  Охладить до 0 °С насыщенного раствора щавелевой кислоты К 2 г порошка магния (слегка увлажненного) добавить щавелевую кислоту Полученный осадок оксалата магния отфильтровать и декантировать небольшим количеством воды. Фильтрат подкислить уксусной кислотой и довести до объема 200 мл (полученный раствор хранить в холодильнике!). Это и есть глиоксиловая кислота. 1 мл 0,005%-го раствора триптофана смешать с равным объемом глиоксиловой кислоты и к смеси прибавляют 10 капель раствора сульфата меди(II). Небольшими порциями добавляют 2–3 мл концентрированной серной кислоты, охлаждая пробирку после приливания очередной порции кислоты током холодной воды (или в ванночке со льдом). Полученную смесь оставляют на 10 мин при комнатной температуре, после чего ставят на 5 мин в кипящую водяную баню. Наблюдается образование сине-фиолетового окрашивания

• 
  Слайд 21

  Реакция Паули (Диазореакция Паули)

  Эта реакция аминокислоту гистидин.

• 
  Слайд 22
  

  при взаимодействии кислого раствора сульфаниловой кислоты с нитритом натрия образуется диазобензолсульфоновая кислота:

• 
  Слайд 23
  

  Диазобензолсульфоновая кислота, взаимодействуя с гистидином, дает соединение вишнево-красного цвета:

• 
  Слайд 24

  Рекомендации к проведению опыта

  В пробирку наливают 1 мл 1%-го раствора сульфаниловой кислоты в 5%-м растворе соляной кислоты. Прибавляют 2 мл 0,5%-го раствора нитрита натрия Сильно встряхивают Немедленно приливают 2 мл 0,01%-го раствора гистидина После перемешивания содержимого пробирки сразу приливают 6 мл 10%-го раствора соды. Появляется интенсивная вишнево-красная окраска.